RESUMO
A maioria dos protocolos utilizados para a criopreservação de sêmen canino, se baseiam em metodologias descritas para outras espécies. Assim, este estudo tem como objetivo avaliar diferentes protocolos de congelação para sêmen desta espécie doméstica. Para tanto, foram utilizados 3 machos, adultos, da raça Buldogue Campeiro, com idades entre 2 a 5 anos e fertilidade comprovada. Foram realizadas 5 colheitas de sêmen de cada animal, pelo método de manipulação digital do bulbo peniano, priorizando a segunda fração do ejaculado. As amostras colhidas foram divididas em 2 grupos, com concentração de 100 x 106 espermatozoides por mL. No grupo 1, as amostras foram diluídas diretamente em meio de congelação comercial Botudog® (Botupharma Biotecnologia Animal). No grupo 2, as amostras foram centrifugadas a 600 g por 10 minutos e em seguida, o pellet foi ressuspendido em meio de congelação comercial Botudog®. As amostras foram envasadas em palhetas de 0,5 mL com concentração de 50 x 106 espermatozoides viáveis. Em seguida, as amostras permaneceram por 1 hora em estabilização a 5ºC. Logo após, transferidas para o vapor de nitrogênio durante 10 minutos, e por fim, mergulhadas em nitrogênio e armazenadas em botijão criogênico. As palhetas foram descongeladas a 46ºC por 15 segundos. Foram avaliados os parâmetros de cinética espermática e integridade de membrana plasmática e acrossomal (IMPA, %). Verificou-se que os parâmetros de motilidade total (%), velocidade linear progressiva (VSL; µm/s), velocidade curvilínea (VCL; µm/s), linearidade (%), percentagem de espermatozoides rápidos (%) e integridade de membrana plasmática e acrossomal avaliados por citometria de fluxo foram superiores no grupo 1, em que as amostras não foram centrifugadas. Estes dados demonstram que, o protocolo para congelação de sêmen canino, utilizando o diluente Botudog®, não preconiza a centrifugação do ejaculado, previamente a congelação.(AU)
Most protocols used for canine semen cryopreservation are based on methodologies described for other species. Thus, this study aims at evaluating different freezing protocols for semen of this domestic species. To this end, 3 adult Bulldog Campeiro males aged 2 to 5 years and proven fertility were used. Five semen samples were collected from each animal using the digital manipulation of the penile bulb method, prioritizing the second fraction of the ejaculate. The collected samples were divided into 2 groups, with a concentration of 100 x 106 sperm per mL. In group 1, the samples were diluted directly into Botudog® commercial freezing medium (Botupharma Animal Biotechnology). In group 2, the samples were centrifuged at 600 g for 10 minutes and then the pellet was resuspended in commercial Botudog® freezing medium. The samples were packed in 0.5 mL straws with a concentration of 50 x 106 viable sperm. Then, the samples remained for 1 hour in stabilization at 5ºC. Afterwards, they were transferred to nitrogen vapor for 10 minutes, and finally, dipped in nitrogen and stored in cryogenic cylinder. The straws were thawed at 46ºC for 15 seconds. Parameters for spermatic kinetics, and plasma and acrosomal membrane integrity (IMPA, %) were evaluated. Total motility (%), progressive linear velocity (VSL; µm/s), curvilinear velocity (VCL; µm/s), linearity (%), percentage of rapid sperm (%) and membrane integrity were found. Plasma and acrosomal samples evaluated by flow cytometry were higher in group 1, where samples were not centrifuged. These data demonstrate that the protocol for canine semen freezing using Botudog® diluent does not recommend centrifugation of the ejaculate prior to freezing.(AU)
La mayoría de los protocolos utilizados para la criopreservación de semen canino se basan en metodologías descritas para otras especies. Por lo tanto, esta investigación tiene como objetivo evaluar diferentes protocolos de congelación para el semen de esta especie doméstica. Con este fin, se utilizaron 3 machos, adultos, de la raza Bulldog Campero, con edades entre 2 a 5 años y fertilidad comprobada. Se realizaron cinco recolecciones de semen de cada animal mediante el método de manipulación digital del bulbo del pene, priorizando la segunda fracción de la eyaculación. Las muestras recolectadas se dividieron en 2 grupos, con una concentración de 100 x 106 espermatozoides por mL. En el grupo 1, las muestras se diluyeron directamente en medio de congelación comercial Botudog® (Botupharma Animal Biotechnology). En el grupo 2, las muestras fueron centrifugadas a 600 g durante 10 minutos y luego el pellet fue resuspendido en medio de congelación comercial Botudog®. Las muestras se envasaron en paletas de 0,5 mL con una concentración de 50 x 106 espermatozoides viables. Luego, las muestras permanecieron durante 1 hora en estabilización a 5ºC. Posteriormente, se transfirieron al vapor de nitrógeno durante 10 minutos y, finalmente, se sumergieron en nitrógeno y se almacenaron en un cilindro criogénico. Las paletas se descongelaron a 46ºC durante 15 segundos. Se han evaluado los parámetros de la cinética espermática y la integridad de la membrana plasmática acrosomal (IMPA, %). Se verificó que los parámetros de motilidad total (%), velocidad lineal progresiva (VSL; µm/s), velocidad curvilínea (VCL; µm/s), linealidad (%), porcentaje de espermatozoides rápidos (%) e integridad de la membrana plasmática y acrosomal evaluadas por citometría de flujo, fueron mayores en el grupo 1, donde las muestras no fueron centrifugadas. Estos datos demuestran que, el protocolo para la congelación de semen canino, usando el diluyente Botudog®, no preconiza la centrifugación del eyaculado, previamente a la congelación.(AU)
Assuntos
Animais , Cães , Sêmen/citologia , Preservação do Sêmen/veterinária , Análise do Sêmen/veterinária , /análise , CãesRESUMO
Quark cheese is fresh cheese obtained by the coagulation of milk through the action mainly of lactic bacteria, resulting in fresh-flavor cheese with high acidity. A specific starter culture is used for its commercial production. However, in this work, this culture was replaced by kefir, a symbiotic system of lactic acid bacteria and yeasts, which is considered a probiotic product. Agave inulin is a soluble fiber regarded as prebiotic with the ability to improve the balance of the intestinal flora. The purpose of this work was to develop Quark cheese using kefir as a starter culture, with supplementation by agave inulin. Cheese was produced using 24-h fermentation at 25 ºC followed by drainage of the whey, with the addition of 3% inulin to the supplemented cheese. After whey drainage, the cheese was kept in plastic pots under refrigeration until analysis. Microbiological, pH and acidity parameters were analysed at 1, 7 and 14 days after manufacture. The results of the physical-chemical analyses remained close to those found in literature. The resulting cheese presented high counts of Lactobacilli indicating their probiotic potential. The addition of agave inulin decreased the amount of those microorganisms; however, they remained in high counts. It can be verified that the use of kefir in the production of Quark cheese is feasible, mainly in artisanal productions since it is usually inexpensive and easy to maintain, and the Lactobacilli remained stable during the storage period.(AU)
O queijo Quark é um queijo de massa fresca obtida por coagulação do leite pela ação principalmente de bactérias láticasobtendo-se um queijo de sabor refrescante, em sua produção comercial é empregada uma cultura starter específica para a produção de queijos, no presente trabalho essa cultura foi substituída pelo kefir, um sistema simbiótico de bactérias láticas e leveduras e que é considerado um produto probiótico. A inulina de agave é uma fibra solúvel considerada prebiótica com capacidade de melhorar o equilíbrio da flora intestinal. O objetivo desse trabalho foi desenvolver queijo Quark empregando kefir como cultura starter e suplementado com inulina de agave. Os queijos foram produzidos por fermentação durante 24h/25ºC seguido por drenagem do soro, no queijo suplementado com inulina foi adicionada 3%, após a dessoragem, os queijos foram mantidos em potes plásticos sob temperatura de refrigeração até o momento das análises, sendo que as microbiológicas, acidez e pH foram realizadas em 1, 7 e 14 dias após a fabricação. Os resultados das análises físico-químicas mantiveram-se próximos aqueles encontrados na literatura. Os queijos obtidos apresentaram altas contagens de Lactobacilli indicando potencial probiótico, a adição de inulina de agave diminuiu o número destes microrganismos, mesmo assim mantiveram-se em altas contagens. Pode-se constatar que o uso de kefir na produção de queijo Quark é viável, principalmente em produções artesanais uma vez que ele normalmente não possui custo e é de fácil manutenção e os Lactobacillimantiveram-se estáveis durante o período de armazenamento.(AU)
El queso Quark es un queso de masa fresca obtenido por coagulación de la leche y acción principalmente de bacterias lácticas, obteniendo un queso de sabor refrescante. En su producción comercial se utiliza un cultivo iniciador específico para producción de quesos, en el presente trabajo esa cultura fue reemplazada por kéfir, un sistema simbiótico de bacterias del ácido láctico y levaduras, que se considera un producto probiótico. La inulina de agave es una fibra soluble considerada prebiótica con la capacidad de mejorar el equilibrio de la flora intestinal. El objetivo de esa investigación ha sido desarrollar queso Quark, usando kéfir como cultivo inicial y complementado con inulina de agave. Los quesos se produjeron por fermentación durante 24h / 25ºC seguido de drenaje del suero, en el queso suplementado con inulina se añadió 3%, después del drenaje del suero y se mantuvieron en macetas de plástico a temperatura de refrigeración hasta el momento del análisis, siendo que las microbiológicas, el pH y la acidez se realizaron a los 1, 7 y 14 días después de la fabricación. Los resultados de los análisis fisicoquímicos se mantuvieron cerca de los encontrados en la literatura. Los quesos mostraron altos conteos de Lactobacilli indicando su potencial probiótico, la adición de inulina de agave disminuyó el número de estos microorganismos, sin embargo, permanecieron en conteos altos. Se puede verificar que el uso de kéfir en la producción de queso Quark es factible, principalmente en las producciones artesanales, ya que por lo general es económico y de fácil manutención. Los lactobacilos se han mantenido estables durante el período de almacenamiento.(AU)
